一種新的雜萜化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從石見(jiàn)穿的干燥地上部分中分離得到的一種 具有神經(jīng)保護(hù)作用的雜帖化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 石見(jiàn)穿系唇形科鼠尾草屬華鼠尾草Salvia chinensis benth的干燥地上部分，亦 名紫參、五鳳花、小丹參、月下紅、烏沙草、墨面風(fēng)、大發(fā)汗、石大川、山縫拿、紫丹花、紅根參、 半枝蓮、田芹菜、活血草，廣泛分布于江蘇、安徽、江西、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、云南等 地。其性涼，味微苦、辛、平，歸胃、肝、肺經(jīng)，有清熱解毒、活血理氣止痛等功能，民間主治噎 嗝、痰喘、肝炎、赤白帶、癰腫、瘰疬等癥。歷代典籍均對(duì)其功效有記載，認(rèn)為其"主骨痛，大 風(fēng)癰腫"（《本草綱目》），"治瘰疬"（《江蘇藥材志》），"治噎嗝，痰飲氣喘"（《蘇州本產(chǎn)藥 材》），"活血化瘀、止血、解毒、消腫"（《浙江民間常用草藥》），"活血止血，清熱解毒"（《安 徽中醫(yī)藥》），"治黃疸型肝炎，濕熱帶下，痛經(jīng)，菌痢，外治面神經(jīng)麻痹，乳腺炎，癤腫，跌打損 傷等"（《浙江藥用植物志》）。
[0003] 到目前為止，從石見(jiàn)穿中分離出的化學(xué)成分已達(dá)30多種，主要包括多糖類(lèi)、萜類(lèi)、 甾醇類(lèi)、多酚類(lèi)等。
[0004] 石見(jiàn)穿具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤等作用。《中藥大辭典》、《全國(guó)中草藥匯編》均記 載了石見(jiàn)穿、糯稻根等合用為方，用于治療急、慢性肝炎均取得了顯著療效。石見(jiàn)穿作為常 用的"抗癌中藥"被廣泛應(yīng)用于臨床。石見(jiàn)穿在婦科疾病治療中也得到了廣泛應(yīng)用，除清熱 利濕外，還具有活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)之功效。因其藥性平和，不燥不寒，故被廣泛應(yīng)用于因血 熱、濕熱所致崩漏、月經(jīng)先期盆腔炎、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、痛經(jīng)等病，療效 顯著。此外，《浙江民間常見(jiàn)草藥》記載紫參根9~12g，羊乳塊根30g，用于治療淋巴結(jié)結(jié) 核，療效顯著。《浙江藥用植物學(xué)》將本品用于治療面神經(jīng)麻痹、乳腺炎、瘡腫等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從石見(jiàn)穿的干燥地上部分中分離得到的一種具有神經(jīng) 保護(hù)作用的雜帖化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I )，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I )的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將石見(jiàn)穿的干燥地上部 分粉碎，用75~85 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b) 步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹(shù)脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再用75%乙 醇洗脫8個(gè)柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b) 中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、50 :1、35:1、15:1和1:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次 用體積比為25:1、18:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中 組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I )。
[0010] 進(jìn)一步地，所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔吸附樹(shù)脂。
[0011] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為80 %。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I )和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I )在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I )，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為化合物（I )結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I )理論E⑶值與實(shí)驗(yàn)E⑶值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021] 實(shí)施例1 :化合物（I )分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來(lái)源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購(gòu)自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購(gòu)自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 制備方法：（a)將石見(jiàn)穿的干燥地上部分（8kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3 次）和水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（355g) 和正丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹(shù)脂除雜，先用10%乙醇 洗脫6個(gè)柱體積，再用75 %乙醇洗脫8個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙 醇洗脫物浸膏（136g) ;(c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比 為80:1 (8個(gè)柱體積）、50:1 (8個(gè)柱體積）、35: U6個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積）和1:1 (5 個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4 (31g)用正相 硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1 (8個(gè)柱體積）、18:1 (10個(gè)柱體積）和5: U6個(gè)柱體 積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2 (Ilg)用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個(gè)柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I )(37mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z 361. 1312，結(jié)合核磁特征可得分子式 為 C17H22O7，不飽和度為 7。核磁共振氫譜數(shù)據(jù) SH(ppm，DMS0-d6,600MHz) :H-2(6.42, s)， Η-5 (3· 34, d，J = 15. I)，Η-5 (2· 67, d，J = 15. I)，Η-7 (2· 75, dd，J = 9· 8, 3· 8)，Η-8 (2· 17， m)，H-8(l. 35，m)，H-9(2. 23，dd，J = 12. 7,7· 3)，Η-9(1· 33，m)，H-ll(3. 79, s)，H-15(l. 23， s)，Η-16(1· 28, s)，1-0Η(11· 87, s)，4-0Η(7· 75, s)，6-0Η(4· 74, s)，7-0Η(5· 37, s)， 3-0CH3(3.86, s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) δε(ΡΡπι，DMS0-d6，125Hz) :158.7(C，1-C)，99.1(CH， 2-C)，154. 6 (C，3-C)，139. 0 (C，4-C)，28. 9 (CH2, 5-C)，59. 8 (C，6-C)，65. 3 (CH，7-C)， 24. 9 (CH2,8-C)，34. 4 (CH2,9-C)，64. I (C，10-C)，63. 8 (CH，11-C)，199. I (C，12-C)，114. 5 (C， 13-C)，122. 7 (C，14-C)，21. I (CH3,15-C)，16. 0 (CH3,16-C)，55. 9 (CH3, 3-0CH3);碳原子標(biāo)記 參見(jiàn)圖1。紅外光譜表明該化合物含有羥基基團(tuán)（3440cm1);此外該化合物在372和291nm 有紫外吸收，說(shuō)明含有多共輒結(jié)構(gòu)。ID NMR譜和HSQC譜顯示有17個(gè)碳信號(hào)，分別為三個(gè)甲 基（包括一個(gè)甲氧基），三個(gè)亞甲基，三個(gè)次甲基（包括一個(gè)烯烴碳）以及八個(gè)季碳。另外， 一個(gè)烯烴質(zhì)子信號(hào)δΗ6. 42(1H，s，H-2)，以及六個(gè)烯碳信號(hào)SC158. 7(C，1-C)，99. 1(CH， 2-C)，154. 6 (C，3-C)，139. 0 (C，4-C)，114. 5 (C，13-C)和 122. 7 (C，14-C)，表明該化合物含 有一個(gè)五取代的苯環(huán)結(jié)構(gòu)。HMBC譜中，羥基質(zhì)子（δΗ11.87, s，l-〇H)與C-l，C-2, C-13 以及δ C199. I (s，12-C)的相關(guān)性表明羰基碳（C-12)與苯環(huán)的13位碳相連，該化合物在 372和291nm的紫外吸收也驗(yàn)證了這一結(jié)論。HMBC譜中，羥基質(zhì)子δΗ7.75(1Η，s，4-OH) 與 δ C139. 0 (C，4-C)，154. 6 (C，3-C)和 122. 7 (C，14-C);甲氧基質(zhì)子 δ Η3· 86 (s，3-0CH3) 與C-3 ;以及H-2與C-3的相關(guān)性表明甲氧基和羥基分別位于C-3和C-4位上。剩余的10 個(gè)碳原子（去除苯環(huán)和甲氧基的七個(gè)碳）形成了一個(gè)十元環(huán)單萜結(jié)構(gòu)。此外，兩個(gè)含氧 碳信號(hào)5 064.1((：，10-〇和63.8(〇1，11-〇表明存在一個(gè)10，11-環(huán)