本技術(shù)提供基因工程化的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(ipsc)及其衍生細(xì)胞。本技術(shù)還提供ipsc或其衍生細(xì)胞表達(dá)用于同種異體細(xì)胞療法的嵌合抗原受體的用途。本技術(shù)還提供相關(guān)載體、多核苷酸和藥物組合物。電子提交的序列表的引用本技術(shù)含有序列表，其通過(guò)efs-web以xml格式的序列表電子提交，文件名為“sequencelisting_st26”，文件大小為536kb，以及創(chuàng)建日期為2023年11月9日。通過(guò)efs-web提交的序列表是本說(shuō)明書(shū)的一部分，并且其整體援引并入本文。

背景技術(shù)：

1、嵌合抗原受體(car)通過(guò)增強(qiáng)免疫效應(yīng)細(xì)胞的抗腫瘤活性在癌癥治療中展現(xiàn)出顯著的活性。car-t細(xì)胞經(jīng)工程化以靶向癌細(xì)胞上表達(dá)的抗原。然而，這些抗原中的一些也可以在正常健康組織上以低水平表達(dá)。若car-t細(xì)胞攻擊那些健康組織，這可能導(dǎo)致靶向/非腫瘤毒性。最熟知的實(shí)例是靶向cd19以治療b細(xì)胞惡性腫瘤的car-t細(xì)胞。cd19也在正常b細(xì)胞上表達(dá)，因此患者可能經(jīng)歷因治療產(chǎn)生的b細(xì)胞不良反應(yīng)(例如，再生障礙或低丙種球蛋白血癥)。其他腫瘤抗原如erbb2(her2)和egfr在肺、肝臟和皮膚的上皮細(xì)胞上具有一些表達(dá)，導(dǎo)致因治療產(chǎn)生的對(duì)那些組織的毒性。需要謹(jǐn)慎選擇抗原和car構(gòu)建體的工程化以最大化特異性。

2、為了解決這些挑戰(zhàn)，本公開(kāi)的實(shí)施方案旨在通過(guò)靶向nectin4(許多腫瘤的腫瘤相關(guān)標(biāo)志物，包括肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、膀胱癌、腎癌、頭頸癌、食管癌和卵巢癌)來(lái)增加響應(yīng)的深度和持久性。本公開(kāi)還提供了基因工程化以表達(dá)靶向健康細(xì)胞抗原(例如，dsg1)的額外抗原結(jié)合劑從而降低脫靶結(jié)合/改善腫瘤靶向特異性的細(xì)胞，無(wú)論是通過(guò)基因工程化細(xì)胞以表達(dá)額外的抑制性car以及抗-nectin4car，還是通過(guò)工程化細(xì)胞以表達(dá)靶向nectin4和健康細(xì)胞抗原的雙重靶向car。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、在一個(gè)總的方面，本公開(kāi)提供一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(ipsc)或其衍生細(xì)胞，其包含：一種或多種外源多核苷酸，其編碼嵌合抗原受體(car)，所述嵌合抗原受體(car)包含靶向nectin4抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域；以及以下中的至少一種：(i)b2m、tap?1、tap?2、tapasin、rfxank、ciita、rfx5、rfxap基因中的一個(gè)或多個(gè)的缺失或減少表達(dá)；(ii)外源多核苷酸，其編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)；(iii)外源多核苷酸，其編碼自然殺傷(nk)細(xì)胞受體免疫球蛋白γfc區(qū)受體iii(fcyriii)、分化簇16(cd16)和/或nkg2d蛋白；(iv)nkg2a或cd70、cd38和cd33基因中的一個(gè)或多個(gè)的缺失或減少表達(dá)；(v)外源多核苷酸，其編碼細(xì)胞因子；(vi)外源多核苷酸，其編碼安全開(kāi)關(guān)；(vii)外源多核苷酸，其編碼psma細(xì)胞示蹤劑；以及(viii)外源多核苷酸，其編碼膜結(jié)合的il-12多肽。在某些實(shí)施方案中，car可以是雙重靶向car，其包含特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的額外的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，細(xì)胞可以包含一種或多種外源多核苷酸，其編碼包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的額外的car，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原。在某些實(shí)施方案中，car可以包含抗-nectin4vhh結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，細(xì)胞因子可以包含il-15。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞還可以包含失活的細(xì)胞表面受體，其可以包含單克隆抗體特異性表位，其中失活的細(xì)胞表面受體和il-15可通過(guò)自體蛋白酶肽可操作地連接。在某些實(shí)施方案中，il-15可以包含il-15和il-15受體α(il-15rα)融合多肽。在某些實(shí)施方案中，il-15可以包含與seq?id?no:72具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞可以包含b2m、tap?1、tap?2、tapasin、rfxank、ciita、rfx5和rfxap基因中的一個(gè)或多個(gè)的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，ipsc細(xì)胞或其衍生細(xì)胞可以包含編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)的外源多核苷酸。在某些實(shí)施方案中，cd16可以為cd16變體蛋白。在某些實(shí)施方案中，cd16變體蛋白可以為高親和力cd16變體。在某些實(shí)施方案中，cd16變體蛋白可以為不可切割的cd16變體。在某些實(shí)施方案中，cd16變體蛋白可以包含具有選自f158v、f176v、s197p、d205a、s219a、t220a的一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代的野生型cd16。在某些實(shí)施方案中，cd16變體蛋白可以包含與seq?id?no:187和188中的任一個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞可以包含編碼cd16蛋白和nkg2d蛋白的外源多核苷酸，其中cd16蛋白和nkg2d蛋白可以通過(guò)自體蛋白酶肽可操作地連接。在某些實(shí)施方案中，nkg2d蛋白可以為野生型nkg2d蛋白。在某些實(shí)施方案中，nkg2d蛋白可以包含與seq?id?no:190具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，自體蛋白酶肽可以選自1型豬捷申病毒2a(p2a)肽、口蹄疫病毒2a(f2a)肽、甲型馬鼻炎病毒(erav)2a(e2a)肽、明脈扁刺蛾病毒2a(t2a)肽、質(zhì)型多角體病毒2a(bmcpv2a)肽和軟化病病毒2a(bmifv2a)肽。在某些實(shí)施方案中，自體蛋白酶肽可以為p2a肽，其包含與seq?id?no:192具有至少90％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，編碼cd16蛋白和nkg2d蛋白的外源多核苷酸可以包含與seq?id?no:193具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸。在某些實(shí)施方案中，外源多核苷酸中的一種或多種可以整合在細(xì)胞染色體上的一個(gè)或多個(gè)基因座上，所述基因座選自aavs1、clybl、ccr5、rosa26、膠原蛋白、htrp、hl?l、gapdh、runx1、b2m、tapi、tap2、tapasin、nlrc5、rfxank、ciita、rfx5、rfxap、tcra或b恒定區(qū)、nkg2a、nkg2d、cd33、cd38、cd70、trac、cis、cbl-b、socs2、pd1、ctla4、lag3、tim3和tigit基因，條件是所述外源多核苷酸中的至少一種可以整合在選自以下基因的基因座上：b2m、tap?1、tap?2、tapasin、rfxank、ciita、rfx5和rfxap基因，從而導(dǎo)致所述基因的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，外源多核苷酸中的一種或多種可以整合在aavs1和b2m基因的基因座上。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞可以包含b2m或ciita基因中的一個(gè)或多個(gè)的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞可以包含b2m和ciita基因的缺失或減少的表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，ipsc是由全(whole)外周血單個(gè)核細(xì)胞(pbmc)重編程的。在某些實(shí)施方案中，ipsc衍生自重編程的t細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，car可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)胞外域，其包含特異性結(jié)合nectin4抗原的結(jié)合結(jié)構(gòu)域；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含特異性結(jié)合nectin4抗原的vhh單域抗體。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含與seq?id?no:105-130之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，胞外域由與seq?id?no:131-156之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，car由與seq?id?no:171-184之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，額外的car可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)額外的胞外域，其包含特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的結(jié)合結(jié)構(gòu)域；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，額外的胞外域可以包含特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的vhh或scfv。在某些實(shí)施方案中，信號(hào)肽可以包含gmcsfr信號(hào)肽或mars信號(hào)肽。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的鉸鏈區(qū)可以獨(dú)立地選自cd28鉸鏈區(qū)、igg4鉸鏈區(qū)和cd8鉸鏈區(qū)。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的跨膜結(jié)構(gòu)域可以獨(dú)立地選自cd28跨膜結(jié)構(gòu)域和cd8跨膜結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含cd3ζ胞內(nèi)域。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的共刺激結(jié)構(gòu)域可以獨(dú)立地選自cd28信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域、41bb信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域和dap10信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，在car中：(i)信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:1、97或98具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(ii)胞外域可以包含與seq?id?no:105-130具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞外域可以由與seq?id?no:131-156具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含與seq?id?no:21或96具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:23或24具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:6具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由與seq?id?no:101具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；并且(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:8或17具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，在car中：(i)信號(hào)肽可以包含具有seq?id?no:1、97或98的序列的氨基酸；(ii)胞外域可以包含具有seq?id?no:105-130之一的序列的氨基酸；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含具有seq?id?no:21或96的序列的氨基酸；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:23或24的序列的氨基酸；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:6的序列的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由具有seq?id?no:101的序列的多核苷酸編碼；并且(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:8或17的序列的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，ipsc或衍生細(xì)胞可以包含編碼安全開(kāi)關(guān)的外源多核苷酸。在某些實(shí)施方案中，安全開(kāi)關(guān)可以包含外源多核苷酸，所述外源多核苷酸編碼失活的細(xì)胞表面受體，所述失活的細(xì)胞表面受體包含單克隆抗體特異性表位。在某些實(shí)施方案中，失活的細(xì)胞表面受體可以選自單克隆抗體特異性表位，其選自替伊莫單抗(ibritumomab,tiuxetan)、莫羅單抗-cd3(muromonab-cd3)、托西莫單抗(tositumomab)、阿昔單抗(abciximab)、巴利昔單抗(basiliximab)、維布妥昔單抗(brentuximab?vedotin)、西妥昔單抗(cetuximab)、英夫利昔單抗(infliximab)、利妥昔單抗(rituximab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、貝伐珠單抗(bevacizumab)、賽妥珠單抗(certolizumab?pegol)、達(dá)利珠單抗(daclizumab)、依庫(kù)珠單抗(eculizumab)、依法利珠單抗(efalizumab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、那他珠單抗(natalizumab)、奧馬珠單抗(omalizumab)、帕利珠單抗(palivizumab)、維泊妥珠單抗(polatuzumab?vedotin)、雷珠單抗(ranibizumab)、托珠單抗(tocilizumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、維得利珠單抗(vedolizumab)、阿達(dá)木單抗(adalimumab)、貝利尤單抗(belimumab)、卡那單抗(canakinumab)、地舒單抗(denosumab)、戈利木單抗(golimumab)、伊匹單抗(ipilimumab)、阿維魯單抗(avelumab)、奧法木單抗(ofatumumab)、帕尼單抗(panitumumab)和烏司奴單抗(ustekinumab)特異性識(shí)別的表位。在某些實(shí)施方案中，失活的細(xì)胞表面受體是截短的表皮生長(zhǎng)因子(tegfr)變體。在某些實(shí)施方案中，tegfr變體由與seq?id?no:71具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸組成。在某些實(shí)施方案中，安全開(kāi)關(guān)可以包含胞內(nèi)域，其具有單純皰疹病毒胸苷激酶(hsv-tk)。在某些實(shí)施方案中，ipsc或衍生細(xì)胞可以包含編碼psma細(xì)胞示蹤劑的外源多核苷酸，其中psma細(xì)胞示蹤劑可以包含包含胞外域，所述胞外域包含psma胞外域或其片段。在某些實(shí)施方案中，ipsc或其衍生細(xì)胞可以包含組合的人工細(xì)胞死亡/報(bào)告系統(tǒng)多肽，其包含胞內(nèi)域、跨膜區(qū)和胞外域，所述胞內(nèi)域具有單純皰疹病毒胸苷激酶(hsv-tk)和接頭，所述胞外域包含psma胞外域或其片段。在某些實(shí)施方案中，hsv-tk可以包含與seq?id?no:229或230具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，組合的人工細(xì)胞死亡/報(bào)告系統(tǒng)多肽可以包含hsv-tk，其通過(guò)接頭融合至截短的變體psma多肽。在某些實(shí)施方案中，截短的變體psma多肽可以包含與seq?id?no:231具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，接頭可以包含自體蛋白酶肽序列，所述自體蛋白酶肽序列選自p2a肽序列、t2a肽序列、e2a肽序列和f2a肽序列。在某些實(shí)施方案中，人工細(xì)胞死亡/報(bào)告系統(tǒng)多肽可以包含與seq?id?no:232具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，人工細(xì)胞死亡/報(bào)告系統(tǒng)多肽可以包含與選自seq?id?no:233-235的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，人工細(xì)胞死亡/報(bào)告系統(tǒng)多肽由與選自seq?id?no:236-238的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，hla-e可以包含與seq?id?no:66具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，和/或hla-g可以包含與seq?id?no:69具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，(i)編碼包含靶向nectin4抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體(car)的一種或多種外源多核苷酸可以包含與選自seq?id?no:171-184的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的核苷酸；(ii)編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)的外源多核苷酸可以包含與seq?id?no:67和70中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的核苷酸；(iii)編碼nk細(xì)胞受體免疫球蛋白γfc區(qū)受體iii(fcyriii、分化簇16(cd16))和/或nkg2d蛋白的外源多核苷酸可以包含與seq?id?no:185、189和191中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的核苷酸；(iv)編碼細(xì)胞因子的外源多核苷酸可以包含與seq?id?no:239具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的核苷酸；(v)編碼安全開(kāi)關(guān)的外源多核苷酸可以包含與seq?id?no:236-238中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的核苷酸；和/或(vi)外源多核苷酸編碼psma細(xì)胞示蹤劑，并且psma細(xì)胞示蹤劑可以包含與seq?id?no:231具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，(i)編碼包含靶向nectin4抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體(car)的一種或多種外源多核苷酸可以包含具有選自seq?idno:171-184的序列的核苷酸；(ii)編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)的外源多核苷酸可以包含具有seq?id?no:67或70的序列的核苷酸；(iii)編碼nk細(xì)胞受體免疫球蛋白γfc區(qū)受體iii(fcyriii、分化簇16(cd16))和/或nkg2d蛋白的外源多核苷酸可以包含具有seq?id?no:185、189或191的序列的核苷酸；(iv)編碼細(xì)胞因子的外源多核苷酸可以包含具有seq?id?no:239的序列的核苷酸；和/或(v)編碼安全開(kāi)關(guān)的外源多核苷酸可以包含具有seq?id?no:236-238之一的序列的核苷酸。在某些實(shí)施方案中，外源多核苷酸可以整合至基因座中，所述基因座獨(dú)立地選自aavs1基因座、b2m基因座、ciita基因座、ccr5基因座、cd70基因座、clybl基因座、nkg2a基因座、nkg2d基因座、cd33基因座、cd38基因座、trac基因座、trbc1基因座、rosa26基因座、htrp基因座、gapdh基因座、runx1基因座、tap1基因座、tap2基因座、tapbp基因座、nlrc5基因座、rfxank基因座、rfx5基因座、rfxap基因座、cish基因座、cblb基因座、socs2基因座、pd1基因座、ctla4基因座、lag3基因座、tim3基因座和tigit基因座。在某些實(shí)施方案中，(i)編碼包含靶向nectin4抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體(car)的一種或多種外源多核苷酸可以整合在aavs1基因的基因座上；(ii)編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)的外源多核苷酸可以整合在b2m基因的基因座上；(iii)編碼nk細(xì)胞受體免疫球蛋白γfc區(qū)受體iii(fcyriii，分化簇16(cd16))和/或nkg2d的外源多核苷酸可以整合在cd70基因的基因座上；(iv)編碼細(xì)胞因子的外源多核苷酸可以整合在nkg2a基因的基因座上；(v)編碼安全開(kāi)關(guān)的外源多核苷酸可以整合在clybl基因的基因座上；并且(vi)存在ciita基因的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，一種或多種外源多核苷酸還編碼一種或多種抑制性car(icar)，所述抑制性car包含至少一個(gè)靶向抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述抗原獨(dú)立地選自腎上腺素能受體β2(adrb2)、水通道蛋白4(aqp4)、緊密連接蛋白10(cldn10b)、橋粒芯膠蛋白(dsc)1、dsc3、橋粒芯糖蛋白(dsg)1、dsg3、含甘油磷酸二酯磷酸二酯酶結(jié)構(gòu)域2(gdpd2)、羥基羧酸受體3(hcar3)、淋巴細(xì)胞抗原6家族成員d(ly6d)以及含v組和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域8(vsig8)。在某些實(shí)施方案中，icar可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)胞外域，其包含特異性結(jié)合至少一種選自以下的抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域：腎上腺素能受體β2(adrb2)、水通道蛋白4(aqp4)、緊密連接蛋白10(cldn10b)、橋粒芯膠蛋白(dsc)1、dsc3、橋粒芯糖蛋白(dsg)1、dsg3、含甘油磷酸二酯磷酸二酯酶結(jié)構(gòu)域2(gdpd2)、羥基羧酸受體3(hcar3)、淋巴細(xì)胞抗原6家族成員d(ly6d)、含v組和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域8(vsig8)；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和/或(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，icar的胞外域可以包含與seq?id?no:354-363中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的胞外域可以由與seq?id?no:364-373中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以包含cd8信號(hào)肽、gmcsfr信號(hào)肽、mars信號(hào)肽或igk信號(hào)肽，或者其變體。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:97和292之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以由與seq?id?no:98、327和378之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的鉸鏈區(qū)可以選自cd28鉸鏈區(qū)、cd45鉸鏈區(qū)、g4s-cd45鉸鏈區(qū)、cd8鉸鏈區(qū)和cxc3r?gpcr鉸鏈區(qū)。在某些實(shí)施方案中，icar的鉸鏈區(qū)可以包含與seq?id?no:21、22、288、289、319和321之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的鉸鏈區(qū)可以由與seq?id?no:315-318、320和322之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域可以獨(dú)立地選自cd28跨膜結(jié)構(gòu)域、cd8跨膜結(jié)構(gòu)域、pd1跨膜結(jié)構(gòu)域、synnotch跨膜結(jié)構(gòu)域和cxc3r?gpcr。在某些實(shí)施方案中，icar的跨膜結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:23、24、290、291、323和325之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的跨膜結(jié)構(gòu)域可以由與seq?id?no:324、326和374-377之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含以下的一種或多種：pd1胞內(nèi)域、lirb1胞內(nèi)域、tigit胞內(nèi)域、ctla4胞內(nèi)域、csk*(yssv)胞內(nèi)域、kir2dl1胞內(nèi)域、dr1胞內(nèi)域、casp8wt胞內(nèi)域、tcasp8胞內(nèi)域、tcasp8-二聚體胞內(nèi)域、tbid15胞內(nèi)域、casp9wt胞內(nèi)域、tcasp9胞內(nèi)域、tcasp9-二聚體胞內(nèi)域、shp1胞內(nèi)域、(g4s)2-shp1胞內(nèi)域、csk胞內(nèi)域、(g4s)2-csk胞內(nèi)域、adam17切割位點(diǎn)、cd28胞內(nèi)域、cd3ζ胞內(nèi)域、g4s3接頭、adam17蛋白酶結(jié)構(gòu)域和(g4s)3-adam17蛋白酶結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，icar的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?idno:6、8和267-287之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由與seq?id?no:266和293-314之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的共刺激結(jié)構(gòu)域可以選自cd28信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域、41bb信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域和dap10信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，在icar中：(i)信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:97或292具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者信號(hào)肽可以由與seq?id?no:98、327或378具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(ii)胞外域可以包含與seq?id?no:354-363之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞外域可以由與seq?id?no:364-373之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含與seq?id?no:21、22、288、289、319或321具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者鉸鏈區(qū)可以由與seq?id?no:315-318、320或322具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(iv)一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域各自包含與獨(dú)立地選自seq?idno:23、24、290、291、323和325的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域可以各自由與獨(dú)立地選自seq?id?no:324、326和374-377的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:6、8和267-287中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由與seq?id?no:266和293-314中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，在icar中：(i)信號(hào)肽可以包含具有seq?id?no:97或292的序列的氨基酸，或者信號(hào)肽可以由seq?id?no:98、327或378的多核苷酸序列編碼；(ii)胞外域可以包含具有seq?id?no:354-363的序列的氨基酸，或者胞外域可以由seq?id?no:364-373的多核苷酸序列編碼；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含具有seq?id?no:21、22、288、289、319或321的序列的氨基酸，或者鉸鏈區(qū)可以由seq?id?no:315-318、320或322的多核苷酸序列編碼；(iv)一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域各自包含具有獨(dú)立地選自seq?id?no:23、24、290、291、323和325的序列的氨基酸，或者一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域可以各自由具有獨(dú)立地選自seq?id?no:324、326和374-377的序列的多核苷酸編碼；并且(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:6、8和267-287中的一個(gè)或多個(gè)的序列的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由seq?id?no:266和293-314之一的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，衍生細(xì)胞可以為自然殺傷(nk)細(xì)胞或t細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，衍生細(xì)胞可以為t細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，t細(xì)胞可以為γδt細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，t細(xì)胞可以為γδvγ9/vδ1t細(xì)胞。

2、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種組合物，其包含本公開(kāi)的衍生細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，組合物還包含一種或多種治療劑或者與一種或多種治療劑聯(lián)合使用，所述治療劑選自肽、細(xì)胞因子、檢查點(diǎn)抑制劑、有絲分裂原、生長(zhǎng)因子、小rna、dsrna(雙鏈rna)、sirna、寡核苷酸、單個(gè)核血細(xì)胞、包含一種或多種感興趣的多核酸的載體、抗體、化療劑或放射性部分或者免疫調(diào)節(jié)藥物(imid)。

3、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種cd34+造血祖細(xì)胞(hpc)，其衍生自本公開(kāi)的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(ipsc)。在某些實(shí)施方案中，car可以是雙重靶向car，其包含特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的額外的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，一種或多種外源多核苷酸編碼包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的額外的car，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原。在某些實(shí)施方案中，cd34+hpc可以還包含編碼人白細(xì)胞抗原e(hla-e)和/或人白細(xì)胞抗原g(hla-g)的外源多核苷酸。在某些實(shí)施方案中，外源多核苷酸中的一種或多種可以整合在細(xì)胞染色體上的一個(gè)或多個(gè)基因座上，所述基因座獨(dú)立地選自aavs1、clybl、ccr5、rosa26、膠原蛋白、htrp、hll、gapdh、runx1、b2m、tapi、tap2、tapasin、nlrc5、rfxank、ciita、rfx5、rfxap、tcra或b恒定區(qū)、nkg2a、nkg2d、cd33、cd38、cis、cbl-b、socs2、pd1、ctla4、lag3、tim3和tigit基因，條件是所述外源多核苷酸中的至少一種整合在選自以下基因的基因座上：b2m、tap?1、tap?2、tapasin、rfxank、ciita、rfx5和rfxap基因，從而導(dǎo)致所述基因的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，外源多核苷酸中的一種或多種可以整合在aavs1和b2m基因的基因座上。在某些實(shí)施方案中，cd34+hpc可具有b2m或ciita基因中的一個(gè)或多個(gè)的缺失或減少表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，car可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)胞外域，其包含特異性結(jié)合nectin4抗原的結(jié)合結(jié)構(gòu)域；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含特異性結(jié)合nectin4抗原的vhh單域抗體。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含與seq?id?no:105-130之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，cd34+hpc可以包含額外的car，其包含：(i)信號(hào)肽；(ii)額外的胞外域，其包含特異性結(jié)合選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的結(jié)合結(jié)構(gòu)域；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域，如包含cd28信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域的共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，額外的胞外域可以包含特異性結(jié)合選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的vhh。在某些實(shí)施方案中，cd34+hpc可以包含編碼cd16蛋白和nkg2d蛋白的額外的外源多核苷酸，其中cd16蛋白和nkg2d蛋白可以通過(guò)自體蛋白酶肽可操作地連接。在某些實(shí)施方案中，cd16蛋白可以為cd16變體蛋白。在某些實(shí)施方案中，cd16變體可以為高親和力cd16變體。在某些實(shí)施方案中，cd16變體可以為不可切割的cd16變體。在某些實(shí)施方案中，cd16變體可以包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代，所述氨基酸取代選自f158v、f176v、s197p、d205a、s219a、t220a及其任何組合。

4、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種嵌合抗原受體(car)多肽，其包含胞外域，所述胞外域包含特異性結(jié)合至nectin4的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，car可以是雙重靶向car，并且其中胞外域可以包含特異性結(jié)合至選自cd70、葉酸受體α、fshr、間皮素和slitrk6的抗原的額外的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，car可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)胞外域，其包含特異性結(jié)合至nectin4抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和/或(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含特異性結(jié)合至nectin4抗原的vhh單域抗體。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以包含與seq?id?no:105-130之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，胞外域可以由與seq?idno:131-156之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，car可以由與seq?id?no:171-184之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，信號(hào)肽可以包含gmcsfr信號(hào)肽或mars信號(hào)肽。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的鉸鏈區(qū)可以獨(dú)立地選自cd28鉸鏈區(qū)、igg4鉸鏈區(qū)和cd8鉸鏈區(qū)。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的跨膜結(jié)構(gòu)域可以獨(dú)立地選自cd28跨膜結(jié)構(gòu)域和cd8跨膜結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含cd3ζ胞內(nèi)域。在某些實(shí)施方案中，car和額外的car中的每一個(gè)的共刺激結(jié)構(gòu)域可以獨(dú)立地選自cd28信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域、41bb信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域和dap10信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，在car中：(i)信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:1、97或98具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(ii)胞外域可以包含與seq?id?no:105-130具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞外域可以由與seq?id?no:131-156具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含與seq?id?no:21或96具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:23或24具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?id?no:6具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由與seq?id?no:101具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；并且(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域可以包含與seq?idno:8或17具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，在car中：(i)信號(hào)肽可以包含具有seq?id?no:1、97或98的序列的氨基酸；(ii)胞外域可以包含具有seq?id?no:105-130之一的序列的氨基酸；(iii)鉸鏈區(qū)可以包含具有seq?id?no:21或96的序列的氨基酸；(iv)跨膜結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:23或24的序列的氨基酸；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?idno:6的序列的氨基酸，或者胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域可以由seq?id?no:101的多核苷酸編碼；并且(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域可以包含具有seq?id?no:8或17的序列的氨基酸。

5、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種抑制性嵌合抗原受體(icar)多肽，其包含胞外域，所述胞外域包含特異性結(jié)合至少一種選自以下的抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域：腎上腺素能受體β2(adrb2)、水通道蛋白4(aqp4)、緊密連接蛋白10(cldn10b)、橋粒芯膠蛋白(dsc)1、dsc3、橋粒芯糖蛋白(dsg)1、dsg3、含甘油磷酸二酯磷酸二酯酶結(jié)構(gòu)域2(gdpd2)、羥基羧酸受體3(hcar3)、淋巴細(xì)胞抗原6家族成員d(ly6d)、含v組和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域8(vsig8)。在某些實(shí)施方案中，icar可以包含：(i)信號(hào)肽；(ii)胞外域，其包含特異性結(jié)合至少一種選自以下的抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域：腎上腺素能受體β2(adrb2)、水通道蛋白4(aqp4)、緊密連接蛋白10(cldn10b)、橋粒芯膠蛋白(dsc)1、dsc3、橋粒芯糖蛋白(dsg)1、dsg3、含甘油磷酸二酯磷酸二酯酶結(jié)構(gòu)域2(gdpd2)、羥基羧酸受體3(hcar3)、淋巴細(xì)胞抗原6家族成員d(ly6d)、含v組和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域8(vsig8)；(iii)鉸鏈區(qū)；(iv)一個(gè)或多個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域；(v)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；和/或(vi)共刺激結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合至少一種選自dsc1、dsc3、dsg1和dsg3的抗原。在某些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合至dsg1。在某些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合至(i)dsg1和(ii)至少一種選自dsc1、dsc3和dsg3的抗原。在某些實(shí)施方案中，icar的胞外域可以包含與seq?id?no:354-363中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的胞外域可以由與seq?id?no:364-373中的一個(gè)或多個(gè)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以包含cd8信號(hào)肽、gmcsfr信號(hào)肽、mars信號(hào)肽或igk信號(hào)肽，或者其變體。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:97和292之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，icar的信號(hào)肽可以由與seqid?no:98、327和378之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼。在某些實(shí)施方案中，在icar中：(i)信號(hào)肽可以包含與seq?id?no:97或292具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸；(ii)胞外域可以包含與seq?id?no:354-363具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者胞外域可以由與seq?id?no:364-373具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼；并且(iii)icar可以包含與seq?idno:242-265和352具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸，或者icar可以包含由與seq?id?no:328-351和353之一具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的多核苷酸編碼的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，在icar中：(i)信號(hào)肽可以包含具有seq?id?no:97或292的序列的氨基酸；(ii)胞外域可以包含具有seq?id?no:354-363之一的序列的氨基酸；和/或(iii)icar可以包含具有seq?id?no:242-265和352之一的序列的氨基酸。

6、在一些方面，本公開(kāi)提供了本公開(kāi)的一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(ipsc)或其衍生細(xì)胞，并且其還可以包含本公開(kāi)的icar。在一些方面，本公開(kāi)提供了一種藥物組合物，其包含本公開(kāi)的衍生物。

7、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種治療有需要的受試者的癌癥的方法，其包括向有需要的受試者給藥本公開(kāi)的衍生細(xì)胞或者本公開(kāi)的組合物。在某些實(shí)施方案中，癌癥可以選自白血病，如aml、cml、all和cll，淋巴瘤，如霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤，以及實(shí)體癌，如肉瘤、皮膚癌、黑色素瘤、膀胱癌、腦癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、肝癌、頭頸癌、食管癌、胰腺癌、腎癌、腎上腺癌、胃癌、睪丸癌、膽囊和膽道癌、甲狀腺癌、胸腺癌、骨癌和大腦癌，以及原發(fā)灶不明癌(cup)。在某些實(shí)施方案中，癌癥可以選自膀胱癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、頭頸癌和食管癌。在某些實(shí)施方案中，受試者在初始癌癥治療后具有微小殘留病變(mrd)。在某些實(shí)施方案中，受試者在一次或多次癌癥治療或者重復(fù)劑量給藥之后沒(méi)有微小殘留病變(mrd)。在某些實(shí)施方案中，所述方法還可以包括向受試者給藥治療劑，所述治療劑選自：替伊莫單抗、莫羅單抗-cd3、托西莫單抗、阿昔單抗、巴利昔單抗、維布妥昔單抗、西妥昔單抗、英夫利昔單抗、利妥昔單抗、阿侖單抗、貝伐珠單抗、賽妥珠單抗、達(dá)利珠單抗、依庫(kù)珠單抗、依法利珠單抗、吉妥珠單抗、那他珠單抗、奧馬珠單抗、帕利珠單抗、維泊妥珠單抗、雷珠單抗、托珠單抗、曲妥珠單抗、維得利珠單抗、阿達(dá)木單抗、貝利尤單抗、卡那單抗、地舒單抗、戈利木單抗、伊匹單抗、阿維魯單抗、奧法木單抗、帕尼單抗和烏司奴單抗。在某些實(shí)施方案中，所述方法還可以包括向受試者給藥治療劑，其中治療劑可以是阿維魯單抗。在某些實(shí)施方案中，細(xì)胞和治療劑可以同時(shí)給藥。在某些實(shí)施方案中，細(xì)胞和治療劑可以依次給藥。

8、在一些方面，本公開(kāi)提供了一種制備本公開(kāi)的衍生細(xì)胞的方法，所述方法包括在細(xì)胞分化條件下對(duì)本公開(kāi)的ipsc進(jìn)行分化，從而獲得衍生細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，ipsc可以通過(guò)基因工程化未修飾的ipsc獲得，其中基因工程化可以包括ipsc基因組的靶向編輯。在某些實(shí)施方案中，靶向編輯可以包括通過(guò)crispr、zfn、talen、歸巢核酸酶、同源重組或這些方法的任何其他功能變化進(jìn)行的缺失、插入或插入/缺失。