用于使用蝶芪誘導(dǎo)udp-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶活性的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]結(jié)合用于細(xì)胞增生性紊亂的治療的方法，描述了用于使用有效量的蝶芪增加或誘導(dǎo)UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性的過程。描述了包含蝶芪的藥物的和營(yíng)養(yǎng)的配制品，適合對(duì)一個(gè)個(gè)體給予這些配制品，以便誘導(dǎo)UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性。
【背景技術(shù)】
[0002]在II相代謝期間，通過內(nèi)源分子的共價(jià)附接，致使內(nèi)源的或外源的底物更親水。II相代謝還稱為共軛代謝，因?yàn)榭梢孕纬晒曹棽糠郑缁撬猁}、葡糖醛酸鹽、谷胱甘肽、甘氨酸鹽、乙酸鹽、和甲基化物。通常，身體使用II相代謝來增加底物分子的親水性，這協(xié)助運(yùn)輸和消除共軛產(chǎn)物。
[0003]由UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)家族的酶催化II相葡糖醛酸化反應(yīng)。葡糖醛酸化反應(yīng)的組成為:將葡萄糖醛酸基團(tuán)從尿苷5’ - 二磷酸-葡糖醛酸(UDP-GA)轉(zhuǎn)移至包含氧、氮、硫或羧基官能團(tuán)的底物分子。UGT酶代表針對(duì)致癌物的致突變性以及異生物質(zhì)與內(nèi)源代謝中間物這二者的毒性的高反應(yīng)性防御系統(tǒng)。而且，在代謝活躍組織中，某些轉(zhuǎn)錄因子，例如過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)在調(diào)節(jié)UGT基因表達(dá)和活性中扮演了活躍角色。參見Runge (朗格)-Morris (莫里斯)等人，PPAR Res.(PPAR研宄)(2009)，文章編號(hào)728941，14頁(yè)，“Regulat1n of Sulfotransferase and UDP-GlucuronosyItransferaseGene Express1n by the PPARs (由PPAR調(diào)節(jié)磺基轉(zhuǎn)移酶和UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶基因表達(dá))” (Hindawi Publ.C0.(Hindawi 出版公司)，紐約)。
[0004]在生物活性的內(nèi)源激素和代謝中間物的調(diào)節(jié)中，葡糖醛酸化發(fā)揮生理學(xué)作用。一種重要的內(nèi)源UGT底物是膽紅素，它的代謝是由UGTlAl嚴(yán)密控制的，因此形成了消去產(chǎn)物膽紅素雙葡糖醛酸酯。另一種亞型，UGT2B4，已知為人肝臟中的主要膽汁酸共軛UGT酶，催化脫氧豬膽酸的葡糖醛酸化。另外，已經(jīng)觀察到，不同亞型的UGT是可誘導(dǎo)的，并且它們的活性的調(diào)節(jié)會(huì)是藥物解毒和消除的重要決定因素。例如，PPAR在UGT的調(diào)節(jié)中起到重要作用(Barbier (巴比爾)等人，J.B1l.Chem.(生物化學(xué)雜志)(2003)278:32852-32860)。
[0005]PPAR核受體網(wǎng)絡(luò)代表細(xì)胞能量平衡的中心決定因素。在與類視黃醇X受體(RXR)的異二聚體合作關(guān)系中，PPAR形成了能夠整合細(xì)胞脂質(zhì)代謝作用、能量穩(wěn)態(tài)、和炎癥中涉及的寬泛范圍的靶基因(包括UGT)的表達(dá)的配體激活的核受體轉(zhuǎn)錄因子。PPAR-α亞型表達(dá)在肝臟、腎臟、和心臟中是最突出的，在這些器官中，它參與調(diào)節(jié)脂肪酸氧化。PPAR-α還可以介導(dǎo)生物轉(zhuǎn)化酶的誘導(dǎo)。使用鑰匙-鎖類比，用于酶受體激活結(jié)合，脂肪酸代表細(xì)胞能量的主要來源并且是PPAR-α的重要生理學(xué)活化劑。上述PPAR-RXR異二聚體，與其他助激活劑相關(guān)聯(lián)，結(jié)合至靶基因的調(diào)節(jié)區(qū)中的稱為過氧化物酶體增殖因子應(yīng)答元件(PPRE)的DNA序列上，啟動(dòng)酶(例如UGT等)的轉(zhuǎn)錄和翻譯。
[0006]因此，為了調(diào)節(jié)UGT的表達(dá)和激活，必須提供適當(dāng)?shù)牟⑶沂沁x擇的酶誘導(dǎo)物。在人體中某些UGT誘導(dǎo)物是已知的，例如氯貝特，它是PPAR-a激動(dòng)劑(Barbier(巴比爾)，已引證)。在大鼠中，UGTlAl是PPAR-α靶基因，并且暴露于某些誘導(dǎo)物，例如PPAR-α激動(dòng)劑可以增加在肝臟中這一 UGT的mRNA表達(dá)(Shelby (謝爾比)等人，Drug Metab.andDisposit1n (藥物代謝與處置)(2006) 34:1772-1778)。
[0007]此外，UGT已經(jīng)示出使12-羥基二十碳四烯酸或12⑶-HETE ( “ 12-HETE”)葡萄糖醛酸化和鈍化。參見Turgeon(特金)等人，J.Lipid Res.(脂質(zhì)研宄雜志)(2003) 44:1182-1191。作為對(duì)某些炎癥性過程、以及還有UV-誘導(dǎo)的損傷和/或皮膚癌發(fā)生的響應(yīng)，由脂氧合酶(LOX)將花生四烯酸(“AA”)(在膜磷脂中天然存在的一種脂肪酸)代謝為多種活性類花生酸。AA的LOX代謝導(dǎo)致產(chǎn)生白細(xì)胞三烯和羥基二十碳四烯酸(HETE)。5-L0X負(fù)責(zé)產(chǎn)生白細(xì)胞三烯和5-HETE，而12-L0X產(chǎn)生12-HETE。確切地，脂氧合酶將AA轉(zhuǎn)化為不穩(wěn)定的過氧化氫-二十碳四烯酸(HPETE)，然后由過氧化酶將它水解為HETE。越來越多的證據(jù)已經(jīng)示出，5-L0X和12-L0X代謝物二者通過對(duì)凋亡的抗性連同增加的增殖、血管生成和細(xì)胞迀移，促進(jìn)了癌發(fā)生。在正常上皮很大程度上不存在的5-L0X和12-L0X 二者，通常在不同上皮癌中組成性地表達(dá)。
[0008]升高水平的12-L0X mRNA已經(jīng)關(guān)聯(lián)至晚期癌癥和預(yù)后不良。另外地，已經(jīng)證明，在小鼠模型中，12-L0X在皮膚癌發(fā)生中起到直接作用，并且與小鼠中的正常皮膚相比，已經(jīng)在皮膚腫瘤中檢測(cè)到12-HETE處于升高水平。確切地，與來自同一小鼠的正常皮膚相比，在乳頭狀瘤和鱗狀細(xì)胞癌中的12-HETE水平高50倍(Virmani，J.(維爾馬尼)等人，CancerLett.(癌癥快報(bào))(2001) 162 (2): 161-165 ；Krieg, P.(克里格)等人，Mol.Carcinog.(分子癌發(fā)生)(1995) 14(2):118-129)。另一小鼠模型證明，使用特異性12-L0X抑制劑(黃芩苷)保護(hù)對(duì)抗皮膚中UVB-誘導(dǎo)的DNA損傷(Bing-Rong, Z.(冰蓉)等人，Photodermatol.Photoimmunol.Photomed.(皮膚光老化的研宄及防護(hù))(2008)24(4): 175-182)。這一結(jié)果進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了 12-HETE在皮膚癌進(jìn)展中的重要性。因此，不打算受理論束縛，假設(shè)通過直接抑制12-L0X，或通過抑制12-L0X信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，即通過降低12-HETE水平，可以治療或預(yù)防人類皮膚癌。如以上討論，UGT可以葡糖醛酸化，并且因此鈍化12-HETE，導(dǎo)致由身體將其消除。然而，通過UV輻射可以下調(diào)皮膚中表達(dá)的UGT，UV輻射是皮膚癌和其他增生性紊亂中的主要可疑致病物。
[0009]鑒于以上內(nèi)容，將希望提供可以通過給予所述誘導(dǎo)物至個(gè)體、動(dòng)物或人類激活或誘導(dǎo)UGT表達(dá)的酶誘導(dǎo)物或激動(dòng)劑。另外，預(yù)期可以激活或誘導(dǎo)UGT表達(dá)的誘導(dǎo)物或激動(dòng)劑還可以降低12-HETE水平，這將用作對(duì)本技術(shù)的有用貢獻(xiàn)。
[0010]此外，使用酶誘導(dǎo)物或激動(dòng)劑用于針對(duì)細(xì)胞增生性紊亂(包括皮膚癌)對(duì)個(gè)體進(jìn)行治療，包括給予需要此類治療的個(gè)體一個(gè)治療有效量的化合物蝶芪(其中UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性被增加)，將代表對(duì)本技術(shù)的有用貢獻(xiàn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]提供了一種針對(duì)細(xì)胞增生性紊亂對(duì)個(gè)體進(jìn)行治療的方法，該方法包括給予需要此類治療的個(gè)體一個(gè)治療有效量的化合物蝶芪，其中m)P-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性被增加。
[0012]在一個(gè)替代性實(shí)施例中，提供了在個(gè)體中(例如患有細(xì)胞增生性紊亂的個(gè)體)防止或抑制UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性的UV-誘導(dǎo)損失的方法，該方法包括給予對(duì)此類治療有需要的個(gè)體一個(gè)治療有效量的化合物蝶芪，其中m)P-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性被增加。
[0013]在另一個(gè)實(shí)施例中，可以通過給予蝶芪降低癌前期光化角化物(AK)病變中的12-HETE 水平。
[0014]仍在另一個(gè)實(shí)施例中，可以通過給予蝶芪降低癌前期的、增生細(xì)胞、或惡性細(xì)胞中的12-LOX表達(dá)水平。
【附圖說明】
[0015]圖1描述了一個(gè)在本發(fā)明的實(shí)施例中的、所提出的代謝途徑，其中UGT可以鈍化12-HETE。
[0016]圖2描繪了在暴露于單次劑量的處于25mJ/cm2的UV-B的正常人類黑素細(xì)胞中，UGT的UV-B下調(diào)。實(shí)心柱:未經(jīng)處理的細(xì)胞；加斜線的柱:從左至右，分別處于4小時(shí)和24小時(shí)的UV-B處理的細(xì)胞。
[0017]圖3描繪了在一個(gè)實(shí)施例中，在正常人類黑素細(xì)胞中，UGT2亞型的UV-B誘導(dǎo)的損失，以及用蝶芪(Ptero)防止了所述損失。UV-B劑量:25mJ/cm2。實(shí)心柱:未經(jīng)處理的細(xì)胞；加斜線的柱..UV-B處理的細(xì)胞；加豎線的柱:用UV-B處理的并且用蝶芪處理的(10nM)。
[0018]圖4描繪了在另一個(gè)實(shí)施例中，通過對(duì)UGT亞型家族成員的總mRNA的RT-PCR分析，在原代培養(yǎng)正常人類角質(zhì)化細(xì)胞中的UGT mRNA表達(dá)(GAPDH作為陽(yáng)性對(duì)照)。
[0019]圖5描繪了在另一個(gè)實(shí)施例中，在正常人類角質(zhì)化細(xì)胞中，UGT2B17亞型的UV-B誘導(dǎo)的損失，以及用蝶芪防止了所述損失。UV-B劑量:25mJ/cm2。實(shí)心柱:未經(jīng)處理的細(xì)胞；加斜線的柱..UV-B處理的細(xì)胞；加豎線的柱:用UV-B處理的并且用蝶芪處理的(10nM)。
[0020]圖6描繪了在另一個(gè)實(shí)施例中，在用處于50μΜ的蝶芪(Ptero)或白藜蘆醇(Res)處理SKmel28人類黑色素瘤細(xì)胞后，用蛋白質(zhì)印跡的12-L0X表達(dá)(B-肌動(dòng)蛋白作為上樣對(duì)照)。
[0021]圖7描繪了在正常皮膚和來自同一人類患者的AK中，12-HETE的測(cè)量水平(η =
6) ο
【具體實(shí)施方式】
[0022]已經(jīng)提供了包含蝶芪的安全并且有效的食用增補(bǔ)劑，可以將它按治療有效量給予個(gè)體，用于治療細(xì)胞增生性紊亂。在一個(gè)實(shí)施例中，一種針對(duì)細(xì)胞增生性紊亂對(duì)個(gè)體進(jìn)行治療的方法包括給予需要此類治療的個(gè)體一個(gè)治療有效量的化合物蝶芪的步驟，其中m)P-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)活性被增加。
[0023]在一個(gè)實(shí)施例中，所述包含蝶芪的安全并且有效的食用增補(bǔ)劑將引起光化角化物(AK)、以及與UV-誘導(dǎo)的皮膚的光損傷有關(guān)的其他癌前變化的復(fù)原。此外，所述包含蝶芪的食用增補(bǔ)劑將用于治療、抑制和/或預(yù)防非黑色素瘤皮膚癌(NMSC)。
[0024]在另一個(gè)實(shí)施例中，一種抑制患有