本發(fā)明涉及復(fù)方血栓通制劑的新用途，尤其是在制備治療paf介導(dǎo)的疾病藥物中的用途。
背景技術(shù)：
血小板活化因子(platelet-activatingfactor,paf；1-o-烷基-2-乙?；?sn-甘油-3磷酸膽堿)，是一種具有生物活性的脂質(zhì)遞質(zhì)，也是迄今為止所知的最強(qiáng)的血小板活化劑。體內(nèi)許多細(xì)胞，如嗜酸、嗜堿、嗜中性粒細(xì)胞、單核巨嗜細(xì)胞、肥大細(xì)胞、血小板和內(nèi)皮細(xì)胞等等，在一定條件刺激下均可產(chǎn)生paf，paf在體內(nèi)有著類(lèi)似于激素的生物學(xué)活性，可作用于多種細(xì)胞和組織。研究表明，paf不但可促進(jìn)血小板聚集，還可使中性粒細(xì)胞聚集，導(dǎo)致氧自由基、腫瘤壞死因子、白介素等的釋放，從而增加血管通透性，導(dǎo)致微循環(huán)障礙及炎性反應(yīng)。臨床上，paf與心血管疾病、哮喘、急性胰腺炎、胃腸潰瘍等疾病密切相關(guān)。目前，已有大量關(guān)于paf受體拮抗劑的研究。由于大量的病理學(xué)免疫和炎性反應(yīng)由paf介導(dǎo)，尋找抑制paf活性的新的藥物就顯得非常有必要了。
復(fù)方血栓通膠囊是上世紀(jì)80年代，由中山大學(xué)眼科中心與廣東眾生藥業(yè)股份有限公司共同研制的復(fù)方中藥制劑，具有活血化瘀，益氣養(yǎng)陰的功效。復(fù)方血栓通膠囊由三七、丹參、黃芪、玄參組成，其組方具有鮮明的中醫(yī)南派用藥特色，臨床上用于血瘀兼氣陰兩虛證的視網(wǎng)膜靜脈阻塞及穩(wěn)定性勞累型心絞痛。專(zhuān)利文獻(xiàn)cn103655910a公開(kāi)了復(fù)方血栓通膠囊具有肝臟保護(hù)作用。目前，尚無(wú)關(guān)于復(fù)方血栓通膠囊抑制paf活性的文獻(xiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供復(fù)方血栓通膠囊在制備治療paf介導(dǎo)的疾病藥物中的用途。
本發(fā)明通過(guò)采用冰水浴聯(lián)合注射腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠急性氣滯血瘀模型實(shí)驗(yàn)證明，復(fù)方血栓通制劑能夠顯著抑制血小板活化因子(paf)活性，對(duì)治療paf介導(dǎo)的相關(guān)疾病具有顯著療效。特別是由paf介導(dǎo)的心肌炎、哮喘、肺氣腫、急性胰腺炎或胃腸潰瘍等疾病均具顯著療效。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明首次公開(kāi)了復(fù)方血栓通制劑在制備治療paf介導(dǎo)的疾病藥物中的用途。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例1
一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料
spf級(jí)(specific-pathogenfree)雄性sd(spraguedawley)大鼠60只，體重180-220g，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：44007200028430；由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物設(shè)施許可證號(hào)：scxk-(粵)2013-0002。
鹽酸腎上腺素注射液(adrenaline，adr；上海禾豐制藥有限公司，批號(hào)：20141009)，生理鹽水、枸櫞酸鈉、水合氯醛(廣州化學(xué)試劑廠)，血小板活化因子(plateletactivatingfactor，paf)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。
二、試驗(yàn)方法
sd大鼠隨機(jī)分為6組，即空白對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照藥(阿司匹林)組、復(fù)方血栓通低劑量組、復(fù)方血栓通中劑量組、復(fù)方血栓通高劑量組，每組10只。動(dòng)物在環(huán)境中適應(yīng)一周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。復(fù)方血栓通膠囊組和陽(yáng)性對(duì)照藥組每天灌胃給藥一次，給藥體積為10ml/kg，連續(xù)給藥10天?？瞻讓?duì)照組和模型組灌胃給予同體積生理鹽水。第11天清晨，灌胃給藥1h后，除空白對(duì)照組大鼠外，其余各組大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素(0.8mg/kg)，2h后將大鼠置于0-4℃冰水內(nèi)冰浴5min，空白對(duì)照組大鼠不作浸冰水處理，2h后大鼠再次皮下注射鹽酸腎上腺素(0.8mg/kg)?？瞻讓?duì)照組皮下注射等體積生理鹽水。各組大鼠均禁食不禁水12h。
次晨，上述各組大鼠均采用10％水合氯醛進(jìn)行腹腔注射麻醉(0.35ml/100g)，2％碘配消毒皮膚后打開(kāi)腹腔進(jìn)行腹主動(dòng)脈采血，部分血液不加抗凝劑，離心分離血清后，利用elisa測(cè)定試劑盒檢測(cè)血小板活化因子paf，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，按試劑盒提供的方法測(cè)定。另外，部分血液用枸櫞酸鈉抗凝(3.2％，血液體積比1：9)，取3.0ml抗凝血液放入tdl-5m冷凍離心機(jī)進(jìn)行第一次離心(500r/m,20℃,10min)得富血小板血漿(prp)，取出富血小板血漿并將剩余部分再次離心(3000r/m,20℃,10min)得貧血小板血漿(ppp)，5μladp(300μmol/l)用于誘導(dǎo)血小板聚集，300μlprp與300μlppp放入北京普利生lby-nj4血小板聚集儀檢測(cè)血小板最大聚集率(mpar)。
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
由表1可見(jiàn)，與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠paf含量顯著升高，血小板聚集率也顯著升高。復(fù)方血栓通膠囊低、中、高劑量組大鼠paf含量和血小板聚集率均比模型組顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01或p<0.05)，且呈一定的量效關(guān)系。結(jié)果說(shuō)明，阿司匹林對(duì)血小板聚集率的抑制不與血小板活化因子(paf)相關(guān)，而復(fù)方血栓通膠囊對(duì)血小板聚集率的抑制作用可能與抑制paf相關(guān)，即發(fā)現(xiàn)復(fù)方血栓通膠囊具有抑制paf這一新用途，為其在制備治療paf介導(dǎo)的疾病藥物中的應(yīng)用提供了依據(jù)。
表1復(fù)方血栓通膠囊對(duì)paf以及血小板聚集率的影響
注：*p<0.05and**p<0.01vs正常組，#p<0.05and##p<0.01vs模型組(n＝10)。