本發(fā)明涉及抗體，具體地，涉及一種抗體及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、cd45（白細胞共同抗原，lca）是一種ⅰ型跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶（ptp），在造血系統(tǒng)中呈譜系特異性高表達，定位于除成熟紅細胞和血小板外的所有有核白細胞膜表面，涵蓋t、b、nk細胞亞群以及單核-巨噬細胞系和樹突狀細胞（dc）。該分子通過其胞內(nèi)段ptp結(jié)構(gòu)域?qū)rc家族激酶（sfk）進行去磷酸化調(diào)控，構(gòu)成t細胞受體（tcr）和b細胞受體（bcr）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的“分子開關(guān)”，從而精確控制淋巴細胞的發(fā)育?checkpoint（陽性/陰性選擇）、克隆擴增、效應(yīng)分化及外周耐受建立。cd45通過選擇性剪接產(chǎn)生多種異構(gòu)體（如cd45ra、rb、ro等），賦予細胞類型特異性的信號閾值調(diào)節(jié)功能；其表達模式異常與重癥聯(lián)合免疫缺陷（scid）、自身免疫病及多種血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生、進展及預(yù)后密切相關(guān)，因而成為免疫治療干預(yù)和生物標(biāo)志物開發(fā)的關(guān)鍵分子靶標(biāo)。
2、cd45由一段重糖基化的胞外結(jié)構(gòu)域、單次跨膜結(jié)構(gòu)域胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成。n端胞外結(jié)構(gòu)域通過第4、5、6號外顯子選擇性剪切形成多種異構(gòu)體（如cd45ra、cd45ro等），這些變體在胞外域長度和糖基化模式上存在差異，影響免疫細胞的定位、遷移及信號傳導(dǎo)特性。此外胞外結(jié)構(gòu)域還由三個膜近端的類纖連蛋白?ii?型結(jié)構(gòu)域、一個富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，而胞內(nèi)域包含兩個串聯(lián)的酪氨酸磷酸酶結(jié)構(gòu)域，其中僅第一個結(jié)構(gòu)域具有催化活性。
3、目前，商業(yè)化cd45抗體存在顯著局限性，主流產(chǎn)品依賴傳統(tǒng)小鼠雜交瘤技術(shù)，生產(chǎn)工藝受限于動物源性體系（如腹水制備），存在批次間差異大、動物倫理爭議及潛在免疫原性等風(fēng)險；且國內(nèi)市場中兔源單抗等高性能抗體品種稀缺，且部分跨國企業(yè)壟斷關(guān)鍵原料供應(yīng)。因此，亟需通過創(chuàng)新開發(fā)策略（如非動物源重組技術(shù)、單b細胞測序技術(shù)）突破技術(shù)壁壘，縮短研發(fā)時間，篩選高親和力、高特異性及低批間差異的cd45抗體。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題至少之一。
2、因此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種抗體或其抗原結(jié)合片段。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包括選自下列至少之一的cdr：重鏈可變區(qū)cdr：seq?id?no:1~3或其保守修飾形式的氨基酸序列；輕鏈可變區(qū)cdr：seq?id?no:4、16、6或其保守修飾形式的氨基酸序列。根據(jù)本發(fā)明實施方案的抗體或其抗原結(jié)合片段能夠高效并特異性的識別cd45，可以有效檢測cd45并診斷與cd45異常表達有相關(guān)性的疾病。
3、在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種核酸分子。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述核酸分子編碼前述的抗體或其抗原結(jié)合片段。根據(jù)本發(fā)明實施方案的核酸分子所編碼的抗體或其抗原結(jié)合片段能夠高效并特異性的識別cd45，可以有效檢測cd45并診斷與cd45異常表達有相關(guān)性的疾病。
4、在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提出了一種表達載體。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，表達載體攜帶前述的核酸分子。由此，有效實現(xiàn)前述的抗體或其抗原結(jié)合片段的表達，進而實現(xiàn)抗體或其抗原結(jié)合片段的體外大量獲得。
5、在本發(fā)明的第四方面，本發(fā)明提出了一種重組細胞。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述重組細胞包括：攜帶前述的核酸分子或表達載體或表達前述的抗體或其抗原結(jié)合片段。利用該重組細胞在適合條件下，能夠在細胞內(nèi)有效地表達前述的抗體或其抗原結(jié)合片段。
6、在本發(fā)明的第五方面，本發(fā)明提出了一種制備第一方面所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括培養(yǎng)第四方面所述的重組細胞。
7、在本發(fā)明的第六方面，本發(fā)明提出了一種偶聯(lián)物。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述偶聯(lián)物包含：前述的抗體或其抗原結(jié)合片段；以及與其偶聯(lián)的偶聯(lián)部分，所述偶聯(lián)部分與所述抗體或其抗原結(jié)合片段相連。本發(fā)明的偶聯(lián)物可特異性的識別cd45，能夠有效檢測cd45并診斷與cd45異常表達有相關(guān)性的疾病。
8、在本發(fā)明的第七方面，本發(fā)明提出了一種試劑或試劑盒。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述試劑或試劑盒包括：前述的抗體或其抗原結(jié)合片段或前述的抗體偶聯(lián)物。本發(fā)明的試劑盒能夠與cd45進行特異性結(jié)合，可有效檢測cd45。
9、在本發(fā)明的第八方面，本發(fā)明提出了前述的抗體或其抗原結(jié)合片段、前述的抗體偶聯(lián)物或試劑或試劑盒在檢測cd45、制備檢測cd45的產(chǎn)品或診斷cd45相關(guān)疾病的產(chǎn)品中的用途。
10、在本發(fā)明的第九方面，本發(fā)明提出了一種檢測測試樣品中cd45的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括將前面所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、抗體偶聯(lián)物或試劑或試劑盒與待檢測樣本中的cd45抗原接觸，形成免疫復(fù)合物。
11、本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。
1.一種抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，包括重鏈框架區(qū)和/或輕鏈框架區(qū)，所述重鏈框架區(qū)和/或輕鏈框架區(qū)的至少一部分來自于兔源抗體、鼠源抗體、人源抗體、靈長目源抗體、羊源抗體、狗源抗體、貓源抗體和羊駝源抗體中的至少之一。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包括：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，包括：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體或其抗原結(jié)合片段進一步包括重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)，所述重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)的至少一部分來自于兔源抗體、鼠源抗體、人源抗體、靈長目源抗體、羊源抗體、狗源抗體、貓源抗體和羊駝源抗體中的至少之一。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體包括選自全長單抗、fab抗體、fab’抗體、f（ab’）2抗體、fv抗體、單鏈抗體、單域抗體以及最小識別單位中的至少之一；或者，所述抗原結(jié)合片段包括選自f(ab’)2片段、fab’片段、fab片段、f(ab)2片段、fv片段、scfv片段、scfv-fc融合蛋白、scfv-fv融合蛋白和最小識別單位中的至少之一。
7.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子編碼權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段。
8.一種表達載體，其特征在于，包含權(quán)利要求7所述的核酸分子。
9.一種重組細胞，其特征在于，所述重組細胞包含權(quán)利要求7所述的核酸分子，權(quán)利要求8所述的載體或者表達權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段。
10.一種制備權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，其特征在于，所述方法包括培養(yǎng)權(quán)利要求9所述的重組細胞。
11.一種抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述抗體偶聯(lián)物包含權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段以及與其偶聯(lián)的偶聯(lián)部分。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述偶聯(lián)部分選自純化標(biāo)簽或標(biāo)記。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述偶聯(lián)部分包括選自膠體金、放射性標(biāo)記、磷光化學(xué)劑、化學(xué)發(fā)光劑、熒光素、酶、天然毒素、核酸、多肽和親和標(biāo)記物中的至少之一；和/或
14.一種試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包含權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或權(quán)利要求11~13任一項所述的抗體偶聯(lián)物。
15.權(quán)利要求1~6任一所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、權(quán)利要求11~13任一項所述的抗體偶聯(lián)物或利要求14所述的試劑或試劑盒在檢測cd45、制備檢測cd45的產(chǎn)品或診斷cd45相關(guān)疾病的產(chǎn)品中的用途。
16.一種檢測測試樣品中cd45的方法，其特征在于，所述方法包括將權(quán)利要求1~6任一項所述的抗體、權(quán)利要求11~13任一項所述的抗體偶聯(lián)物或權(quán)利要求14所述的試劑或試劑盒與待檢測樣品中的cd45抗原接觸，形成免疫復(fù)合物。