專利名稱：制備高純度賽門苷Ⅰ的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域的方法，具體是一種制備高純度賽門苷I的方法。
背景技術(shù)：
羅漢果SiraitiaeFructus為我國特產(chǎn)藥材，具有清熱潤肺、利咽開音、潤腸通便之功效，常用于肺熱燥咳、咽痛失音、腸燥便秘的治療。羅漢果主要含有羅漢果甜苷等化學(xué)成分，羅漢果甜苷為一系列葫蘆烷型三萜皂苷，常作為天然甜味劑在藥品、食品、飲料中廣泛應(yīng)用。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，羅漢果甜苷中賽門苷I，即siamenoside I
權(quán)利要求
1.一種制備高純度賽門苷I的方法，其特征在于，通過將羅漢果水煮后的上清液通過大孔樹脂吸附后經(jīng)減壓洗脫得到浸膏，將浸膏溶解，取上清液上ODS柱，洗去雜質(zhì)后得到賽門苷I粗品，再將粗品進(jìn)行Si^phadex LH-20柱層析，經(jīng)乙醇梯度洗脫后進(jìn)行HPLC檢測(cè)并合并含賽門苷I的流份，最后回收溶劑即得賽門苷I精制品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征是，所述方法具體步驟包括 1)將羅漢果粉碎成粗粉加水煎煮后離心處理并收集上清液； 2)將步驟I)得到的上清液通過大孔樹脂吸附后，用40%(v/v)酒精洗去雜質(zhì)，然后用60-80% (v/v)酒精洗脫，最后從洗脫液中回收乙醇并得到浸膏； 3)將浸膏用60%(v/v)酒精溶解、離心，取上清液上ODS柱，先用60% (v/v)酒精洗去雜質(zhì)，然后采用70-90% (v/v)酒精洗脫；最后從洗脫液中回收乙醇并進(jìn)行HPLC檢測(cè)，合并含賽門苷I的流份得到賽門苷I粗品； 4)將賽門苷I粗品進(jìn)行Si^phadexLH-20柱層析，經(jīng)乙醇梯度洗脫后進(jìn)行HPLC檢測(cè)并合并含賽門苷I的流份，最后回收溶劑即得賽門苷I精制品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述的加水煎煮中，水的用量為粗粉重量的6-12倍；煎煮時(shí)間為O. 5-lh。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的方法，其特征是，所述的上清液為將第一次收集后的殘余物重復(fù)上述加水煎煮和離心處理后合并兩次處理的上清液。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述的酒精洗脫的流速為8-10mL/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述的乙醇梯度洗脫是指依次用70%、80%、90% (v/v)酒精(各300mL)梯度洗脫(流速3mL/min),每份30mL進(jìn)行洗脫。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，步驟2)和步驟3)中，洗脫液的用量均為大孔樹脂的柱體積、ODS柱的I. 5-2. 5倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，步驟3)和步驟4)中的HPLC檢測(cè)是指以O(shè)DS柱為色譜柱，設(shè)置檢測(cè)波長為205nm，流動(dòng)相為乙腈-水25 75 (v/v)，流速為LOmL/min0
全文摘要
一種生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域的制備高純度賽門苷Ⅰ的方法，通過將羅漢果水煮后的上清液通過大孔樹脂吸附后經(jīng)減壓洗脫得到浸膏，將浸膏溶解，取上清液上ODS柱，洗去雜質(zhì)后得到賽門苷Ⅰ粗品，再將粗品進(jìn)行Sephadex LH-20柱層析，經(jīng)乙醇梯度洗脫后進(jìn)行HPLC檢測(cè)并合并含賽門苷Ⅰ的流份，最后回收溶劑即得賽門苷Ⅰ精制品。本發(fā)明通過水提法，采用三種不同分離機(jī)制的柱層析進(jìn)行分離，整個(gè)過程只使用乙醇、水，不使用有毒溶劑；具有純度高、得率高、工藝簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07J17/00GK102942611SQ20121052635
公開日2013年2月27日 申請(qǐng)日期2012年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月7日
發(fā)明者李曉波, 王夢(mèng)月, 邢世華, 黃文武, 沈?yàn)t男 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)