專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝及其制品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及的是制備冬凌草甲素微細(xì)顆粒的工藝，特別涉及的是一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝及其制品。
背景技術(shù)：
：就藥物而言，顆粒的大小可以直接影響到藥物的被吸收程度和藥效。一般來(lái)說(shuō)，藥物顆粒越小，比表面積越大就越容易溶解在人體的體液內(nèi)，能被人體較完全地吸收，從而起到很好的療效，較大顆粒的藥物則因?yàn)槿芙獾乃俣容^為緩慢，很難能被完全吸收利用而達(dá)到期盼的藥效?，F(xiàn)有技術(shù)中，藥物顆粒的細(xì)化通常采用壓碎法、球磨法、溶液法、超臨界流體結(jié)晶技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。但是，前兩種方法得到的顆粒粒徑分布常常較寬，很難滿(mǎn)足現(xiàn)今高新技術(shù)的要求；溶液法雖然能獲得較窄的顆粒粒徑分布，但所用的有機(jī)溶劑時(shí)常會(huì)殘留在顆粒中而引起不必要的副作用；超臨界流體結(jié)晶技術(shù)是制備納米微米藥物的新方法，其原理是利用超臨界流體如二氧化碳等與藥物溶液在超臨界狀態(tài)下混合從噴嘴噴出，在幾十微秒內(nèi)形成納米微米級(jí)微粒。通過(guò)調(diào)節(jié)壓力、溫度、流量、濃度等參數(shù)，可以控制藥物粒度、晶型甚至從同素異形體中選擇需要的形態(tài)。超臨界流體結(jié)晶技術(shù)與傳統(tǒng)結(jié)晶方法生產(chǎn)的超細(xì)粉相比，其結(jié)晶理想，表面光滑，粒度均勻，幾乎無(wú)殘留溶劑。新方法是一步到位生產(chǎn)法，毋須干燥粉碎等后處理，生產(chǎn)過(guò)程無(wú)一廢，被稱(chēng)為綠色技術(shù)。超臨界流體結(jié)晶技術(shù)還能使藥物與高分子輔料形成復(fù)合顆粒，即充分利用藥物和輔料各自特性制各功能獨(dú)特新穎的給藥系統(tǒng)。利用新技術(shù)生產(chǎn)的微米級(jí)藥物可以經(jīng)口或鼻腔直接送入肺泡內(nèi)發(fā)揮作用。蛋白質(zhì)和肽類(lèi)等極不穩(wěn)定的大分子也能獲得穩(wěn)定結(jié)構(gòu)產(chǎn)生較長(zhǎng)療效。一些難于吸收或味道極差的藥物則可利用涂層包裹，達(dá)到速釋、緩釋、控釋、掩味等功能。因此，超臨界流體結(jié)晶技術(shù)已經(jīng)成為各種化學(xué)藥物及生化藥物超新型制劑的技術(shù)平臺(tái)。冬凌草甲素化學(xué)名稱(chēng)，為Kaur-16-en-15-one，7，20ipoxy_l，6，14-tertrahydroxy-,(12，6b，7a，14R)。冬凌草甲素為一種無(wú)色棱柱狀晶體，味苦，相對(duì)分子質(zhì)量304.42。冬凌草甲素是貝殼杉烯骨架的四環(huán)二萜類(lèi)化合物，是植物冬凌草最重要的抗腫瘤成分，藥理試驗(yàn)證明該成分抗癌譜較廣，可通過(guò)多種途徑誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，對(duì)人肝癌BEL-7402細(xì)胞，非小細(xì)胞肺癌組織NCI-H520，NCI-H460,NCI-HI299，人白血病HL-60細(xì)胞，食管癌CaES-17細(xì)胞，結(jié)腸癌HCT8細(xì)胞及人黑色素瘤細(xì)胞等均有明顯細(xì)胞毒作用。臨床上主要采用冬凌草甲素注射液治療原發(fā)性肝癌、食管癌，并取得了一定療效。此外，由于該成分難溶于水，常規(guī)注射劑多依靠加入表面活性劑或有機(jī)溶劑來(lái)提高溶解性，長(zhǎng)期靜脈滴注易引起患者血管發(fā)炎和疼痛等副作用。因此，如何增大溶解性和靶向性，并延長(zhǎng)藥物的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間，是提高其療效的關(guān)鍵。目前人們十分渴望出現(xiàn)一種將冬凌草甲素藥物制成的顆粒超細(xì)化工藝，找出合適晶型提高該藥溶解度和療效，降低使用成本和毒副作用的工藝；同時(shí)適用的劑型還有干粉吸入劑、氣霧劑、透皮制劑和乳膏劑等。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于發(fā)明一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝及其制品，它能夠克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種適合冬凌草甲素的超微細(xì)粉，提高該藥溶出度和療效，應(yīng)用超臨界流體結(jié)晶技術(shù)制備冬凌草甲素微細(xì)顆粒的工藝。本發(fā)明的技術(shù)方案是一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于它包括以下步驟(1)配置冬凌草甲素溶液按照有機(jī)溶劑冬凌草甲素為2001-101的比例將冬凌草甲素充分溶解于有機(jī)溶劑中，使冬凌草甲素的濃度為0.05-10%，溶解溫度控制在20-800C；(2)將步驟⑴中配制的冬凌草甲素溶液與溶液泵相連，工作壓力控制為2-150MPa；(3)二氧化碳進(jìn)料將鋼瓶?jī)?nèi)的CO2通過(guò)增壓泵閥輸入超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系，進(jìn)入結(jié)晶釜，流量控制在5-150ml/min，控制啟動(dòng)溫度20_80°C；壓力為2_150MPa；(4)將上述步驟(1)中配置的冬凌草甲素溶液通過(guò)溶液泵經(jīng)超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系中噴嘴急速?lài)娙虢Y(jié)晶釜內(nèi)，流量控制在l-20ml/min；將夾帶劑通過(guò)夾帶劑溶液泵噴入結(jié)晶釜內(nèi)，流量控制為l-20ml/min；操作時(shí)間為40至240min；持續(xù)通入C02，通入步驟(1)中的有機(jī)溶劑將設(shè)備管路中剩余的溶劑洗凈；(5)冬凌草甲素結(jié)晶析出在結(jié)晶釜底部收集從溶劑中析出的冬凌草甲素微晶態(tài)或無(wú)定型態(tài)微細(xì)顆粒，所得物即為冬凌草甲素微細(xì)顆粒。上述所說(shuō)的步驟(1)中的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、乙醚或乙酸乙酯中的至少一種。上述所說(shuō)的步驟(2)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。上述所說(shuō)的步驟(4)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。上述所說(shuō)的步驟⑷中噴嘴溫度為20-100°C，其噴射距離為l-50cm。上述所說(shuō)的步驟(4)中的夾帶劑為無(wú)水乙醇、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮或氯仿。上述所說(shuō)的步驟(5)中的得到的冬凌草甲素微細(xì)顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。一種根據(jù)上述工藝制得的冬凌草甲素微細(xì)顆粒，其特征在于它為白色松散無(wú)定型微細(xì)粉末，其顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。本發(fā)明的原理和檢測(cè)進(jìn)行說(shuō)明本發(fā)明是將冬凌草甲素在超臨界流體溶液中通過(guò)噴嘴3，由高壓狀態(tài)以超音速急速?lài)姷降蛪旱闹車(chē)h(huán)境中。壓力的急速減小使溶液形成極度的過(guò)飽和，所溶解的溶質(zhì)就在極短的時(shí)間內(nèi)析出。利用這一技術(shù)制得的顆粒通常很小，可達(dá)微米級(jí)，甚至納米級(jí)，而且顆粒粒徑分布很窄，分散性好。對(duì)藥物結(jié)晶和粒子工程來(lái)說(shuō)，重要的是超臨界流體的可壓縮性高而且容易控制，在臨界點(diǎn)附近，溫度和壓力的微小改變可使溶劑的密度、擴(kuò)散系數(shù)、粘度、表面張力、溶解度等產(chǎn)生明顯的變化。當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的超臨界流體是二氧化碳，純度高99.999%，臨界溫度和臨界壓力較低(Tc=37.3°C，Pc=7.15MPa)無(wú)臭無(wú)毒無(wú)污染，化學(xué)惰性無(wú)腐蝕，不易燃爆使用安全，廉價(jià)易得回收方便，產(chǎn)品質(zhì)量高，生產(chǎn)周期短，而被廣泛應(yīng)用于脫除咖啡因及食品佐料、保健品等方面的分離和提純。近年來(lái)，在藥物、聚合物和催化劑等顆粒的制各上受到國(guó)內(nèi)外廣泛的重視和研究。本發(fā)明的優(yōu)越性在于1、本發(fā)明工藝適合冬凌草甲素原料，能制出超細(xì)化微細(xì)顆粒，利于人體吸收，能提高冬凌草甲素溶解度和療效，降低使用成本和毒副作用；2、經(jīng)本發(fā)明制備的冬凌草甲素超微顆粒，在臨床具備獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，該藥物優(yōu)勢(shì)如下a、由于冬凌草甲素在體內(nèi)分布廣泛，缺乏對(duì)腫瘤部位的特異親和性，且體內(nèi)生物半衰期短，常需加大給藥劑量才能使藥物在靶部位產(chǎn)生一個(gè)較高的濃度，以提高治療效果，然而給藥劑量的增大會(huì)導(dǎo)致患者的順應(yīng)性降低，并引發(fā)毒副反應(yīng)，本發(fā)明制成的冬凌草甲素的超微細(xì)粉，適合肺部吸入給藥，用藥方便，直接靶向作用于肺部腫瘤；b、由于該成分難溶于水，常規(guī)注射劑多依靠加入表面活性劑或有機(jī)溶劑來(lái)提高溶解性，長(zhǎng)期靜脈滴注易引起患者血管發(fā)炎和疼痛等副作用，因此，本發(fā)明解決的是增大冬凌草甲素的溶解性，通過(guò)粉霧劑或氣霧劑的吸入給藥，經(jīng)由肺泡直接進(jìn)入血液循環(huán)，使用方便，患者的順應(yīng)性提高；C、超微細(xì)粉適合制成干粉制齊U，由于不采用氟代烷烴類(lèi)拋射劑(CFCs)，屬于綠色環(huán)保產(chǎn)品；d、超微細(xì)粉的溶劑殘留低于中國(guó)藥典2005版要求；f、動(dòng)態(tài)粒徑分布達(dá)到中國(guó)藥典2005版粉霧劑要求，能廣泛地用于多種制劑的開(kāi)發(fā)。附圖本發(fā)明所涉一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝中超臨界流體抗溶劑設(shè)備連接及流程示意圖。其中，1為冬凌草甲素溶液，2為溶液泵，3為噴嘴，4為結(jié)晶釜，5為氣液分離釜，6為氣體排放口，7為殘夜收集器，8為增壓泵，9為C02，10為夾帶劑溶液泵，Pl為設(shè)備體系壓力，P2為結(jié)晶釜工作壓力。具體實(shí)施例方式實(shí)施例一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于它包括以下步驟(1)配置冬凌草甲素溶液按照有機(jī)溶劑冬凌草甲素為1002的比例將冬凌草甲素充分溶解于有機(jī)溶劑中，使冬凌草甲素的濃度為2.0%，溶解溫度控制在40°C；(2)將步驟(1)中配制的冬凌草甲素溶液1與溶液泵2相連，工作壓力控制為15MPa；(3)二氧化碳進(jìn)料將鋼瓶?jī)?nèi)的C029通過(guò)增壓泵閥8輸入超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系，進(jìn)入結(jié)晶釜4，流量控制在lOml/min，控制啟動(dòng)溫度45°C；壓力為15MPa；(4)將上述步驟(1)中配置的冬凌草甲素溶液通過(guò)溶液泵2經(jīng)超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系中噴嘴3急速?lài)娙虢Y(jié)晶釜4內(nèi)，注入300ml冬凌草甲素的溶液，流量控制在1.5ml/min；將夾帶劑通過(guò)夾帶劑溶液泵10噴入結(jié)晶釜4內(nèi)，流量控制為1.5ml/min；操作時(shí)間為IOOmin；持續(xù)通入C02，通入步驟(1)中的有機(jī)溶劑將設(shè)備管路中剩余的溶劑洗凈；(5)冬凌草甲素結(jié)晶析出在結(jié)晶釜4底部收集從溶劑中析出的冬凌草甲素微晶態(tài)或無(wú)定型態(tài)微細(xì)顆粒，所得物即為冬凌草甲素微細(xì)顆粒；(6)殘留物經(jīng)氣液分離釜5處理，氣體由氣體排放口6排出，殘液流入殘液收集器7。上述所說(shuō)的步驟(1)中的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。上述所說(shuō)的步驟(2)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。上述所說(shuō)的步驟(4)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。上述所說(shuō)的步驟(4)中噴嘴溫度為45°C，其噴射距離為5cm。上述所說(shuō)的步驟(4)中的夾帶劑為無(wú)水乙醇。上述所說(shuō)的步驟(5)中的得到的冬凌草甲素微細(xì)顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。一種根據(jù)上述工藝制得的冬凌草甲素微細(xì)顆粒，其特征在于它為白色松散無(wú)定型微細(xì)粉末，其顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。對(duì)用本發(fā)明工藝制備的冬凌草甲素微細(xì)顆粒粒徑分布的檢測(cè)方法及結(jié)果用激光動(dòng)態(tài)光散射粒度儀對(duì)超臨界流體結(jié)晶技術(shù)制備后的的粒徑及其分布進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定條件為取樣品采用干法測(cè)試，測(cè)定溫度為25°C，有效粒徑為lOum，測(cè)定結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>χ射線多晶衍射分析方法進(jìn)行樣品前處理成均勻分散的固體粉末，樣品測(cè)試。檢測(cè)條件石墨單色器單色化CuKa輻射；管電40kV；管流70mA，掃描速度4°C/min，掃描范圍5°50°(2θ)。未經(jīng)處理樣品X射線衍射圖顯示冬凌草甲素在10°30°之間有密而細(xì)的結(jié)晶峰，表明冬凌草甲素以穩(wěn)定的晶型存在。經(jīng)超臨界流體結(jié)晶制備的冬凌草甲素圖譜在5°飛0°沒(méi)有特征的衍射峰，呈無(wú)定型特征。含量測(cè)定方法儀器Waters公司高效液相色譜儀，Waters2487紫外檢測(cè)儀，515HPLC泵。冬凌草甲素對(duì)取本品適量，精密稱(chēng)定，置IOOml量瓶中，流動(dòng)相為甲醇一水(5050)加流動(dòng)相溶解溶液，搖勻精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成每Iml中含0.20mg的供試品溶液。另取冬凌草甲素對(duì)照品，精密稱(chēng)定，置IOOml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成每Iml中含0.2mg對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各lOul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。經(jīng)測(cè)試制備前后二批樣品其含量均在標(biāo)示量的95.0-105.0%范圍內(nèi)，測(cè)定數(shù)據(jù)見(jiàn)下表制備前后樣品含量測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本品含冬凌草甲素C20H2806應(yīng)為標(biāo)示量的95.0-105.0%，符合藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。權(quán)利要求一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于它包括以下步驟(1)配置冬凌草甲素溶液按照有機(jī)溶劑冬凌草甲素為200∶1-10∶1的比例將冬凌草甲素充分溶解于有機(jī)溶劑中，使冬凌草甲素的濃度為0.05-10％，溶解溫度控制在20-80℃；(2)將步驟(1)中配制的冬凌草甲素溶液與溶液泵相連，工作壓力控制為2-150MPa；(3)二氧化碳進(jìn)料將鋼瓶?jī)?nèi)的CO2通過(guò)增壓泵閥輸入超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系，進(jìn)入結(jié)晶釜，流量控制在5-150ml/min，控制啟動(dòng)溫度20-80℃；壓力為2-150MPa；(4)將上述步驟(1)中配置的冬凌草甲素溶液通過(guò)溶液泵經(jīng)超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系中噴嘴急速?lài)娙虢Y(jié)晶釜內(nèi)，流量控制在1-20ml/min；將夾帶劑通過(guò)夾帶劑溶液泵噴入結(jié)晶釜內(nèi)，流量控制為1-20ml/min；操作時(shí)間為40至240min；持續(xù)通入CO2，通入步驟(1)中的有機(jī)溶劑將設(shè)備管路中剩余的溶劑洗凈；(5)冬凌草甲素結(jié)晶析出在結(jié)晶釜底部收集從溶劑中析出的冬凌草甲素微晶態(tài)或無(wú)定型態(tài)微細(xì)顆粒，所得物即為冬凌草甲素微細(xì)顆粒。2.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟(1)中的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、乙醚或乙酸乙酯中的至少一種。3.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟(2)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。4.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟(4)中的溶液泵為高效液相色譜溶液泵。5.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟(4)中噴嘴溫度為20-100°C，其噴射距離為l-50cm。6.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟⑷中的夾帶劑為無(wú)水乙醇、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮或氯仿。7.根據(jù)權(quán)利要求1所說(shuō)的一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于所說(shuō)的步驟(5)中的得到的冬凌草甲素微細(xì)顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。8.一種根據(jù)上述工藝制得的冬凌草甲素微細(xì)顆粒，其特征在于它為白色松散無(wú)定型微細(xì)粉末，其顆粒粒徑為d(0.5)=5.135um。全文摘要一種冬凌草甲素微細(xì)顆粒的制備工藝，其特征在于它包括以下步驟(1)配置冬凌草甲素溶液；(2)將步驟(1)中配制的冬凌草甲素溶液與溶液泵相連；(3)二氧化碳進(jìn)料；(4)將上述步驟(1)中配置的冬凌草甲素溶液通過(guò)溶液泵經(jīng)超臨界流體抗溶劑設(shè)備體系中噴嘴急速?lài)娙虢Y(jié)晶釜內(nèi)；(5)冬凌草甲素結(jié)晶析出。一種根據(jù)上述工藝制得的冬凌草甲素微細(xì)顆粒，其特征在于它為白色松散無(wú)定型微細(xì)粉末，其顆粒粒徑為d(0.5)＝5.135um。本發(fā)明提供一種適合冬凌草甲素的超微細(xì)粉，提高該藥溶出度和療效，應(yīng)用超臨界流體結(jié)晶技術(shù)制備冬凌草甲素微細(xì)顆粒的工藝。文檔編號(hào)C07D493/08GK101798308SQ20081015455公開(kāi)日2010年8月11日申請(qǐng)日期2008年12月25日優(yōu)先權(quán)日2008年12月25日發(fā)明者張俊,郭震,魏海申請(qǐng)人:國(guó)家納米技術(shù)與工程研究院