專(zhuān)利名稱(chēng)：蝸牛復(fù)合酶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用酸浸、真空超膜濃縮工藝從蝸牛嗉囊中提取蝸牛復(fù)合酶的方法。
本發(fā)明工藝流程如下預(yù)處理→破殼取嗉囊→酸浸提→真空過(guò)濾→ 本發(fā)明工藝流程說(shuō)明1、預(yù)處理挑選成年的新鮮健康的活蝸牛，經(jīng)過(guò)多次清洗，并用0.1‰的高錳酸鉀溶液進(jìn)行消毒。
2、破殼取嗉囊將消毒后的蝸牛送入破殼機(jī)破殼，取出嗉囊，將嗉囊放入壓碎機(jī)中壓碎，將壓碎后的嗉囊液放入低溫均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)兩次，均質(zhì)溫度為0-4℃。
3、酸浸提將均質(zhì)后的嗉囊液加入3-5倍重量的檸檬酸磷酸鹽緩沖液攪拌浸提，時(shí)間2小時(shí)，檸檬酸磷酸鹽緩沖液的濃度由PH值確定，
緩沖液要求PH值為5，將浸提液放入冷庫(kù)備用。
4、真空過(guò)濾將均質(zhì)浸提后的嗉囊液放入真空精濾機(jī)內(nèi)清濾，真空壓力為756-758mmHg，5、低溫分離將精濾液放入高速分離機(jī)內(nèi)分離，溫度為0-4℃，分離轉(zhuǎn)速為1-1.5萬(wàn)轉(zhuǎn)/分，時(shí)間20分鐘。
6、低溫超膜濃縮取高速分離后的上清液，讓其通過(guò)移相微孔膜進(jìn)行超膜濃縮成3倍液備用，溫度為0-4℃，7、超低溫冷凍干燥取濃縮3倍液放入超低溫，真空冷凍干燥，即得蝸牛復(fù)合酶干品，溫度為-40--80。
8、成品將干品用復(fù)合包裝袋進(jìn)行定量包裝，在20-35℃存放、避光、防潮，在此條件下不會(huì)失去活性。
本發(fā)明利用酸浸提和超膜濃縮方法直接從蝸牛嗉囊中提取蝸牛復(fù)合酶，提取的蝸牛復(fù)合酶純度可達(dá)到98％以上，由于設(shè)備需要少，工藝方法簡(jiǎn)單、原材料來(lái)源廣、價(jià)格低廉，使生產(chǎn)蝸牛復(fù)合酶的成本十分低廉，提高了蝸牛的綜合利用價(jià)值，為農(nóng)副產(chǎn)品的深加工提供了技術(shù)保障。
實(shí)施例2取1000公斤35-50克重的新鮮健康的活蝸牛，用與實(shí)施例1同樣的方法將蝸牛經(jīng)過(guò)預(yù)處理，破殼取嗉囊，酸浸提，真空過(guò)濾，低溫分離，低溫超膜濃縮，超低溫冷凍干燥，用與實(shí)施例1同樣的制備條件得到50克的蝸牛復(fù)合酶干品，純度達(dá)到98％以上。
實(shí)施例3取5000公斤35-50克的新鮮健康的活蝸牛，用與實(shí)施例1同樣的方法和工藝條件得到250克的蝸牛復(fù)合酶干品，干品純度達(dá)到98％以上。
權(quán)利要求
1.一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于它是利用PH值為5的檸檬酸磷酸鹽緩沖液直接浸提蝸牛嗉囊，經(jīng)過(guò)真空過(guò)濾，低溫分離，通過(guò)低溫移相微孔膜進(jìn)行濃縮，在低溫下冷凍干燥后得到的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于檸檬酸磷酸鹽緩沖液與蝸牛嗉囊液重量比為3-5∶1；浸提時(shí)間為2小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于低溫移相微孔膜濃縮溫度為0-4℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于真空過(guò)濾壓力為756-758mmHg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于低溫分離溫度為0-4℃，分離轉(zhuǎn)速為1-1.5萬(wàn)轉(zhuǎn)/分，時(shí)間為20分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于超低溫冷凍干燥溫度為-40--80℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蝸牛復(fù)合酶的制備方法，其特征在于成品保存溫度20-35℃。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用酸浸提和真空超膜濃縮工藝從蝸牛嗉囊中提取蝸牛復(fù)合酶的方法，其特征在于，將鮮活蝸牛的嗉囊取出經(jīng)過(guò)破碎，均質(zhì)后利用pH值為5的檸檬酸磷酸鹽緩沖液直接浸提蝸牛嗉囊液，再經(jīng)過(guò)真空過(guò)濾，低溫分離，低溫移相微孔膜濃縮，在－40－－80℃溫度下冷凍干燥，得到蝸牛復(fù)合酶干品，用本工藝制備的蝸牛復(fù)合酶純度98％以上，工藝簡(jiǎn)單，成本低廉，原料來(lái)源廣。
文檔編號(hào)C07K1/36GK1462800SQ0212079
公開(kāi)日2003年12月24日 申請(qǐng)日期2002年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月31日
發(fā)明者陳玉柱 申請(qǐng)人:陳玉柱